杆粒提取试剂盒

BacmidExtractionKit

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产品规格：次/次

产品简介：

适用于大量从DH10Bac转化株提取重组杆粒pFastBac。纯化后的杆粒DNA使用PCR检验或者进行转染。

产品内容:

操作步骤：

1.5ml离心管10rpm离心1min收集细胞。

2.真空吸干上清，0.3ml的Solution1重悬沉淀，轻轻地震荡或上下混匀。

3.0.3ml的Solution2轻轻混匀，室温孵育5min。注意：悬浮的沉淀应该从浑浊到几乎半透明。

4.缓慢加入0.3mlKAC，加入过程中轻轻混匀，冰上放置5-10min。

5.10rpm离心10min。

6.轻轻将上清转移到含有0.8ml异丙醇的离心管，不要吸到白色沉淀，颠倒混匀，冰上孵育5-10min。

7.室温10rpm离心15min。

8.小心弃去上清，不要浮起沉淀，加入0.5mlWashBuffer，颠倒离心管数次清洗沉淀。

9.室温10rpm离心5min。重复8和9。

10.轻轻吸弃上清，室温5-10min干燥沉淀，不要过分干燥。注意：勿使用真空离心选装蒸发仪去干燥DNA。

11.40μlEndSolution重新溶解DNA沉淀，为避免剪切，勿机械重悬DNA，让溶液顺管子轻轻流下溶解DNA。

注意事项：

1.不推荐纯化的杆粒DNA存在-20℃，因为反复冻融会剪切DNA。

2.分析重组杆粒DNA（PCR鉴定重组杆粒DNA）或转染昆虫细胞。

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